Уточнение овцы

Том 13 научных докладов, Номер статьи: 13912 (2023) Цитировать эту статью

128 доступов

3 Альтметрика

Подробности о метриках

Разработка новых методов лечения SARS-CoV-2 необходима для расширения набора инструментов стратегий вмешательства для борьбы с глобальной пандемией. В этом исследовании для создания продуктов-кандидатов использовалась гипериммунная плазма овец, иммунизированных целым шипом рекомбинантного белка SARS-CoV-2. В дополнение к очищенному IgG мы усовершенствовали возможные методы лечения, удалив неспецифический IgG посредством аффинного связывания, а также фрагментацию для устранения области Fc и создания фрагментов F(ab')2. Эти препараты были оценены на активность in vitro и продемонстрировали сильную нейтрализующую способность против ряда штаммов SARS-CoV-2, включая Omicron B2.2. Кроме того, на модели заражения хомяка SARS-CoV-2 оценивали их защиту от проявлений заболевания и вирусной нагрузки. Результаты продемонстрировали защитные эффекты как IgG, так и F(ab')2, причем последний требует последовательного дозирования для поддержания активности in vivo из-за быстрого выведения из кровообращения.

Вспышка тяжелого острого респираторного синдрома коронавируса-2 (SARS-CoV-2), приведшая к продолжающейся глобальной пандемии, впервые объявленной в марте 2020 года1, создала острую необходимость разработки и оценки новых мер вмешательства. В рамках этой деятельности мы разработали очищенные овечьи иммуноглобулины против всего шиповидного белка SARS-CoV-2, а также иммуноглобулины, специфичные для отдельных субъединиц S1 и S2, которые обеспечивают защиту от возникновения заболевания2.

Несмотря на высокую эффективность терапевтического воздействия, одной из основных проблем, связанных с терапией антисыворотками и цельными IgG, является риск сывороточной болезни3,4 и аллергических реакций5. Кроме того, было продемонстрировано, что антитела, специфичные к SARS-CoV, демонстрируют усиливающий эффект, особенно заметный при введении в низких дозах6. Это антителозависимое усиление также было дополнительно подтверждено у SARS-CoV-27,8. Помимо этих потенциально неблагоприятных последствий, при инфекции SARS-CoV-2 острое повреждение легких было связано с Fc-областью специфического антиспайкового IgG9. Чтобы преодолеть эти эффекты, было предпринято удаление региона Fc для использования в пассивной иммунотерапии следующего поколения10,11,12.

Удаление Fc может привести к образованию моновалентных (Fab) или двухвалентных (F(ab')2) фрагментов. Меньшие фрагменты Fab быстро выводятся через функции почек13, и в клинических исследованиях было показано, что они выводятся в 5–7 раз быстрее, чем F(ab')214. Помимо преимуществ уменьшения побочных эффектов, меньший размер и пониженное сродство к клеткам фрагментов F(ab')2 позволяют им проникать глубже в ткани, тем самым обеспечивая активность во внесосудистых областях15,16 и распределение по всем частям тела, включая легкие17 . В целом эти дополнительные свойства могут дать преимущества перед использованием реконвалесцентной плазмы, впервые разрешенной для экстренного использования Управлением по контролю за продуктами и лекарствами США (FDA) на ранних стадиях пандемии.

Иммуноглобулины животного происхождения широко использовались в качестве противоядий18 и вплоть до антитоксинов19. Использование гипериммунных сывороток для создания терапии на основе антител против инфекционных заболеваний применялось в отношении SARS-CoV20, MERS-CoV21, Эболы22,23,24 и вируса птичьего гриппа25. Во время пандемии COVID-19 эту методологию использовали несколько групп, хотя в качестве исходного источника антител в основном использовали лошадей17,26. В этой работе мы описываем использование подхода на основе овец. Овцы являются подходящей альтернативой, поскольку лошади считаются животными-компаньонами и не допускаются для производства антител в таких странах, как Великобритания18. Мы переработали гипериммунную плазму овец, иммунизированных цельным рекомбинантным белком SARS-CoV-2, в три препарата: очищенный IgG, аффинно-очищенный IgG и фрагменты F(ab')2 (рис. 1), активность которых мы затем оценили in vitro. перед оценкой на разработанной модели заражения хомяков инфекцией SARS-CoV-227.