Усиление ОРВИ

Научные отчеты, том 13, Номер статьи: 4690 (2023) Цитировать эту статью

8094 Доступа

1 Цитаты

2 Альтметрика

Подробности о метриках

Тесты на антигены с латеральным потоком широко использовались во время пандемии Covid-19, что позволяет ускорить получение результатов диагностических тестов и предотвратить дальнейшее распространение вируса за счет изоляции инфицированных лиц. Выполнение этого скрининга должно осуществляться с помощью тестов, которые показывают удовлетворительную чувствительность, чтобы успешно обнаружить целевой белок и избежать ложноотрицательных результатов. Целью этого исследования было создание теста латерального потока, который мог бы обнаруживать нуклеокапсидный белок SARS-CoV-2 в низких концентрациях, сопоставимых с пределами обнаружения, заявленными существующими на рынке тестами. Для этого в ходе исследований и разработки прототипов потребовалось несколько корректировок, пока они не стали соответствовать этим критериям. Предложенные альтернативы увеличения концентрации антител в тест-линии и добавления межмембраны между подушечкой конъюгата и нитроцеллюлозной мембраной позволили увеличить чувствительность в четыре раза и создать новый прототип быстрого теста, названный «межмембранный иммуноанализ с боковым потоком» (LFIIT). . Этот прототип продемонстрировал адекватный предел обнаружения (2,0 нг/мл), сохраняя при этом доступность и простоту производственных процессов.

В декабре 2019 года несколько пациентов были госпитализированы в городе Ухань, провинция Хубэй, Китай, с пневмониеподобными респираторными симптомами неизвестной этиологии, при этом последующие исследования показали убедительные доказательства того, что уханьский рынок морепродуктов и дикой природы Хуанань может быть связан со вспышкой. Возбудитель был идентифицирован как бетакоронавирус подрода сарбековирусов, принадлежащий к подсемейству Orthocoronavirinae, и первоначально был назван 2019-nCoV, который позже будет переименован в SARS-CoV-21.

Коронавирусы представляют собой оболочечные одноцепочечные РНК-вирусы с положительным смыслом, которые поражают главным образом дыхательные пути, но также способны вызывать неврологические, кишечные и печеночные эффекты2,3. До декабря 2019 года было известно шесть коронавирусов, заражающих человека, четыре из них вызывали легкие гриппоподобные симптомы, а два других были ответственны за высокопатогенные эпидемии: SARS-CoV и MERS-CoV4,5,6. Аналогичным образом, в марте 2020 года Всемирная организация здравоохранения (ВОЗ) объявила новую коронавирусную болезнь (COVID-19) глобальной пандемией, вызванной SARS-CoV-27,8.

SARS-CoV-2 имеет 79,5% генетического сходства с SARS-CoV, а сборка вирусных частиц зависит от четырех основных структурных белков: мембранного (M), нуклеокапсидного (N), оболочечного (E) и шипового (S) белков, а также белков неструктурные и вспомогательные белки9,10. Основной метод заражения SARS-CoV-2 основан на гликопротеине Spike, который имеет тримерную структуру на поверхности вируса. Он состоит из двух субъединиц: S1 и S2, поскольку S1 имеет рецептор-связывающий домен (RBD) и отвечает за связывание с ангиотензинпревращающим ферментом 2 (ACE2), основным рецептором SARS-CoV-2 в клетках-хозяевах11. По этой причине белку Spike уделяется большое внимание при исследованиях и разработке терапевтических препаратов и вакцин для лечения COVID-1912. Однако белок Spike также является структурным белком, на который больше всего влияют генетические мутации различных вариантов SARS-CoV-2, что приводит к важным изменениям в распознавании антител, влияющим на диагностические тесты и вакцины13. Подобные исследования показали, что белок N гораздо более консервативен между вариантами, и его мутации пока не влияют на связывание антител в экспресс-диагностических тестах, что делает его лучшей мишенью для экспресс-тестирования антигена SARS-CoV-214.

Быстрое тестирование имеет ряд преимуществ перед традиционными лабораторными методами, которые требуют обученного персонала, оборудования и требуют больше времени для получения результатов15. Более того, тестирование на антигены, как правило, хорошо коррелирует со статусом контагиозности пациента, являясь мощным инструментом для изоляции инфицированных и снижения распространения вируса по сравнению с молекулярными методами16.